|
质粒类型:
|
毕赤酵母表达载体
|
|
表达水平:
|
高拷贝
|
|
启动子:
|
AOX1
|
|
克隆方法:
|
多克隆位点，限制性内切酶
|
|
载体大小:
|
9276 bp
|
|
5' 测序引物及序列:
|
5´ AOX1:5´-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3´； alpha-Factor-F: 5´-TACTATTGCCAGCATTGCTGC-3´
|
|
3' 测序引物及序列:
|
3´ AOX1:5´-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3´
|
|
载体标签:
|
N-alpha factor
|
|
载体抗性:
|
Ampicillin (氨苄青霉素)
|
|
筛选标记:
|
HIS4
|
|
备注:
|
利用alpha分泌因子，分泌表达蛋白。
|
|
产品编号
|
产品名称
|
规格
|
价格
|
|
1344
|
pPIC9K
|
2ug质粒
|
询价
|
pPIC9K载体中存在卡那抗性基因，允许利用卡那抗性在酵母体内筛选多克隆拷贝，载体其余部分与pPIC9载体完全一样。pPIC9K载体能够使用的毕赤酵母宿主菌是KM71和GS115。 pPIC9K载体详细信息如下：
-
pPIC9载体大小9276 bp，是融合表达载体。
-
载体构建过程中，可供使用的单一限制性内切酶位点为SnaB I, EcoR I, Avr II, Not I.
-
利用alpha因子分泌信号肽，分泌表达蛋白基因。
-
在载体构建过程中，你的基因必须保证与信号肽的起始密码子的读码框一致。
-
毕赤酵母中利用HIS4进行筛选。
-
为了将基因插入GS115或KM71的AOX区, 使用SacI限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+Mut+基因型，KM71中产生His+ MutS基因型)
-
为了将基因插入GS115或KM71的His4区, 使用Sal I或者Stu I限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+ Mut+基因型，KM71中产生His+ MutS基因型)
-
将基因插入GS115的AOX1区域，需要使用Bgl II线性化质粒 (产生His+MutS基因型)。
|
|
|
